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海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒

簡要描述:

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個葡萄糖分子組成的一個非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細胞表面形成的保護膜,有效地保護生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。

更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1217

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒

商品詳情:
測定意義:

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個葡萄糖分子組成的一個非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細胞表面形成的保護膜,有效地保護生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)是該途徑中海藻糖合成關鍵酶之一,該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下?杈?

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3324

100管/48樣

微量法

YSH3324-1

50管/24樣

可見分光光度法

測定原理:

TPP催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖,同時釋放出磷酸根,使用鉬銻抗比色法測定。

需自備的儀器和用品:  

酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細菌或細胞總數(shù),2000萬。

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海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒20T/10樣NADPH氧化酶活性測試盒/比色法

50管/48樣NADP磷酶(NADPase)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP磷酶(NADPase)測試盒/微量法

50管/48樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測試盒/微量法

50管/48樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP-MDH)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP-MDH)測試盒/微量法

50T/24樣NAD激酶(NADK)測試盒/比色法

50管/24樣NAD激酶(NADK)測試盒/分光光度法
注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。


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